本发明属于生物技术领域,具体涉及一种多肽纳米颗粒及其制备方法和应用。该多肽纳米颗粒包括聚乙烯亚胺,聚乳酸羟基乙酸和KALA多肽。本发明通过对PEI进行改性,即引入生物相容性优秀的PLGA大幅改善了PEI的细胞毒性,形成核壳结构的纳米颗粒,利用KALA多肽的穿膜性提高了基因载体被细胞吞噬的能力,其稳定的核壳结构延缓了目标基因的释放,从而增加了转染持续时间,在降低细胞毒性的同时提高了基因传递的效率,并且成本低,制作工艺简单,生产过程中不涉及有毒试剂,可广泛应用于基因治疗。

本发明提供了一种靶向巨噬细胞的载体系统。具体地,本发明提供了一种靶向巨噬细胞的纳米粒子载体系统,包括其组分、制备方法及其在药物和核酸传递方面的应用。本发明所提供的纳米粒子的主体材料具有生物可降解性、生物相容性和延时缓释性,可局部或全身注射性。并且,本发明的合成方法简便高效,制得的纳米粒子表面含有高密度的靶向元件,能够将药物和基因高效率地靶向递送至巨噬细胞。本发明中富含靶向元件和显影剂的纳米粒子可以特异性富集于巨噬细胞,用于疾病的诊断和治疗。

本发明属于基因技术领域,公开了一种LncRNA ANRIL在儿童急性淋巴细胞白血病中的临床应用,调控基因的表达体为LncRNAANRIL；所述确定LncRNA ANRIL在ALL细胞系中的表达模式的方法包括：进行RNA提取及qRT-PCR；进行细胞培养；进行RNAi实验；进行细胞增殖及凋亡测定；进行统计学分析。本发明采用qPCR分析ANRIL在儿童ALL中的表达模式及其在该病的临床诊断、分型、治疗等方面潜在的应用价值,并进行体外实验验证其异常表达对白血病细胞增殖及凋亡的影响,验证其重要的调控功能和生物学机制,为阐明ANRIL的调控机制及临床转化和应用提供指导,并进一步进行体外实验为ANRIL的临床转化和应用提供指导。

本发明公开了一种基于三联吡啶釕催化短肽共价组装形成的非病毒载体及其制备方法和应用,所述制备方法包括以下步骤：将反义寡核苷酸与三联吡啶氯化钌溶液混合,孵育得到DNA-[Ru(bpy)-(3)]～(2+)溶液；将DNA-[Ru(bpy)-(3)]～(2+)溶液、含酪氨酸的靶向肽溶液、过硫酸铵溶液混合,进行白光照射,离心后即可得到所述非病毒载体；其具有合成简单,绿色,高效等特点；该非病毒载体可在在基因传递或作为靶向药物中进行应用。

本发明公开了一种具有心肌靶向性的基因递送载体及其制备方法,涉及基因递送载体技术领域。本发明的递送载体包括空白载体与DNA,其中,空白载体与DNA的质量比例为25：1；所述空白载体包括DOTAP、大豆卵磷脂、DOPE-mPEG1000、胆固醇、TAT和PCM,其中,所述TAT和PCM分别占空白载体总脂质摩尔量的1％和3％；所述DOTAP、大豆卵磷脂、DOPE-mPEG1000、胆固醇的摩尔比为2:4:1:3。本发明采用生物相容性很好的脂质体作为基因递送载体的母体,克服了脂质体靶向性差、基因递送效果差的缺点,引入了两种不同作用的多肽进行修饰,该基因递送系统在心肌细胞内具有较高的基因表达效率。

本申请涉及一种基于LEAPER技术的核酸药物,及使用该核酸药物靶向编辑RNA治疗疾病例如赫勒氏综合征(Hurler syndrome)的方法。该方法包括使用所述核酸药物进行RNA上由腺苷到次黄嘌呤碱基的编辑,精准地修复例如赫勒氏综合征(Hurler syndrome)的致病性G>A突变位点,恢复由RNA编码的蛋白例如IDUA在体内的正常表达。

本发明公开了hACE2人源化转基因猪的构建方法及应用。采用CRISPR-Cas9基因编辑技术,用hACE2cDNA替换猪自身的ACE2基因,避免了人源ACE2表达的同时猪内源ACE2也表达,由此造成猪模型无法很好地再现人类疾病特征的问题。本发明构建的hACE2人源化猪模型是能够模拟人类COVID-19临床症状和治疗反应的理想大动物猪模型,可用于SARS-CoV-2感染和发病机制的研究,特别适合于由SARS-CoV-2感染所致的多器官病症、重症、慢性疾病以及后遗症的研究,并可供诊断技术、抗病毒疗法和疫苗的开发与测试,候选药物疗效和安全性的评价,该模型有助于解决当前缺乏有效新冠肺炎动物模型的困境。

公开了用于对NK细胞进行基因工程改造的组合物和方法。

本申请公开了一种用于治疗炎症性肠病的间充质干细胞及其应用。本申请用于治疗炎症性肠病的间充质干细胞由趋化因子受体CCR9的核酸转染到间充质干细胞而成。本申请用于治疗炎症性肠病的间充质干细胞,能够特异靶向炎症性肠病的病损部位,并且归巢能力强,大大提高了间充质干细胞归巢到病损部位的数量,提高了炎症性肠病的治疗效果；为炎症性肠病的治疗提供了一种新的个体化、精准治疗治疗方案和思路。

本发明涉及融合蛋白以及其使用方法。融合蛋白包含第一蛋白和第二蛋白,其中第一蛋白是Cas,如Cas9、Cas12a、Cas12b、Cas12e以及TALEN或ZFN,第二蛋白是核酸外切酶或者核酸内切酶,如TREX2、TREX1、APE1、Artemis、CtIP、Exo1、Mre11、RAD1、RAD9、Tp53、WRN、外切核酸酶V、T5外切核酸酶或T7外切核酸酶。第一蛋白与第二蛋白是直接连接的或者通过接头连接。本发明的融合蛋白可以保证基因编辑过程中的基因组稳定性,降低单基因或多基因编辑过程中的染色体结构变异的产生。本发明的融合蛋白提高CAR-T构建过程中T细胞的基因组稳定性,防止改造的CAR-T细胞发生瘤变。