本发明涉及无细胞体系蛋白质合成技术领域,尤其涉及一种提高无细胞体系蛋白质合成的方法,针对现有的无细胞体系蛋白质合成技术仍存在合成蛋白质的效率较低的问题,现提出如下方案,其中包括以下步骤：S1：材料选择,S2：转录及翻译,S3：蛋白质合成,S4：生物调控,S5：检验成果,本发明的目的是通过荧光标记模板DNA,对蛋白质的合成过程进行观察,便于后续对蛋白质的合成速度进行调控,并通过弱化作用对合成蛋白质的过程进行调控,提高蛋白质的合成效率。

本发明公开一种基于假attP位点自发定向整合的通用型微环DNA表达载体及其构建方法与应用,其中该微环DNA表达载体由目的基因、PPAP序列和微环DNA质粒构成,所述PPAP序列包括依次连接的polyA加尾信号、启动子、反向attB序列、ΦC31整合酶基因和终止密码子,所述反向attB序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述的ΦC31整合酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示,所述终止密码子的核苷酸序列为TGA。本发明提供的微环DNA表达载体能够自发定向、特异性地整合到真核细胞基因组内假attP位点,避免质粒随机插入引起的基因表达沉默和其他安全隐患,从而使目的基因安全持续高效表达,具有较高的生物安全性。

本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种编码新型冠状病毒B.1.351突变株抗原的DNA分子、DNA疫苗及应用。本发明提供的SEQ ID NO.1核酸序列在真核表达系统中能够高效转录和表达,而且具有免疫原性,表现在体液免疫和细胞免疫应答中,以此作为活性成分的核酸疫苗同样具有良好的免疫原性。

本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种新型冠状病毒DNA疫苗。本发明提供的DNA分子组合中SEQ ID NO.1-4可以分别表达四种新冠突变株的S蛋白,优势在于在真核表达系统中可以高效转录和表达,同时具有良好的免疫原性。制备的疫苗可以有效预防和/或治疗新型冠状病毒感染和感染的相关疾病。

本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种新型冠状病毒B.1.617.1突变株DNA疫苗。本发明提供的核酸序列如SEQ ID NO.1所示,在表达蛋白依然为新型冠状病毒B.1.617.1突变株S蛋白的前提下,优化得到的核酸序列可以在真核表达系统中高效转录和表达,同时具有良好的免疫原性。

本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种编码新型冠状病毒P.1突变株抗原的DNA分子、DNA疫苗及应用。本发明提供的SEQ ID NO.1核酸序列在真核表达系统中能够高效转录和表达,而且具有免疫原性,表现在体液免疫和细胞免疫应答中,以此作为活性成分的核酸疫苗同样具有良好的免疫原性。

本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种编码新型冠状病毒B.1.1.7突变株抗原的核酸序列及其应用。本发明提供的SEQ ID NO.1核酸序列在真核表达系统中能够高效转录和表达,而且具有免疫原性,表现在体液免疫和细胞免疫应答中,以此作为活性成分的核酸疫苗同样具有良好的免疫原性。

本发明提供了一种基于CRISPR-Cas13a干预阻断逆转录生物体的逆转录转座的技术。本发明揭示了一种基于CRISPR-Cas13a干预阻断逆转录生物体逆转录转座的技术,以及用于阻断逆转录生物体在真核细胞内逆转录转座的体系及其应用。本发明中以Tf1这一逆转录病毒的模型体系进行了研究和论证。本发明的技术方案不仅首次利用Cas13a实现对逆转录转座的抑制,而且其阻断逆转录转座的效率较为理想。

本发明揭示了一种基于CRISPR-Cas12a干预阻断逆转录生物体的逆转录转座的技术,以及用于阻断逆转录生物体在真核细胞内逆转录转座的体系及其应用。本发明还揭示了用于有效检测逆转录生物体在细胞内转座情况的测试模型及测试方法,以Tf1这一逆转录病毒的模型体系进行了研究和论证。本发明的技术方案不仅首次利用Cas12a实现对逆转录转座的抑制,而且其阻断逆转录转座的效率非常高。

本发明涉及生物技术领域,尤其涉及赤霉素代谢调节物的应用。本发明通过研究发现,外源给予赤霉素或通过给予赤霉素代谢调节物可以对藻类生理过程产生影响,包括调节藻类生长、调节藻类次生代谢产物积累或调节藻类的抗逆性等。实验表明,外源给予赤霉素合成抑制剂能够抑制藻类生长,而给予赤霉素则可以促进藻类生长。