一种提高无细胞体系蛋白质合成的方法

本发明涉及无细胞体系蛋白质合成技术领域,尤其涉及一种提高无细胞体系蛋白质合成的方法,针对现有的无细胞体系蛋白质合成技术仍存在合成蛋白质的效率较低的问题,现提出如下方案,其中包括以下步骤：S1：材料选择,S2：转录及翻译,S3：蛋白质合成,S4：生物调控,S5：检验成果,本发明的目的是通过荧光标记模板DNA,对蛋白质的合成过程进行观察,便于后续对蛋白质的合成速度进行调控,并通过弱化作用对合成蛋白质的过程进行调控,提高蛋白质的合成效率。

2021-11-02

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基于群体感应的自诱导调控系统及其应用

本发明公开了一种基于群体感应的自诱导调控系统,包括luxI、luxR和egfp,其中,控制luxI和luxR表达的启动子选自P-(luxI)、P-(BB)或P-(J23100)；控制egfp表达的启动子选自P-(luxI)、P-(luxI)(T-38C)或P-(luxI)(C-77T)。所述的基于群体感应的自诱导调控系统在大肠杆菌工程菌的目的基因表达、自动调控中的应用,在制备褐藻胶裂解酶、酯酶中的应用。本发明还公开了包含该基于群体感应的自诱导调控系统的重组表达载体、重组工程菌。本发明对群体感应系统中的启动子进行改造筛选,构建了适合褐藻胶裂解酶和酯酶的自诱导调控系统,可实现褐藻胶裂解酶的高密度、高酶活发酵。

2021-11-02

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一种表达调控元件及其应用

本发明提供了一种表达调控元件及其应用,具体地,涉及表达调控元件及其在调控一个或多个基因在细胞中的表达中的用途,本发明还公开了表达调控元件在植物育种中的应用。本发明进一步公开了利用本发明表达调控元件提高目标基因表达的方法,所述方法包括将本发明的表达调控元件与目标基因可操作地连接来提高该目标基因的表达。

2021-10-29

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一种用于多基因转化的慢病毒载体表达系统

本发明提供一种利用分裂单一筛选标记实现对多基因转化的慢病毒载体表达系统,包括慢病毒载体表达系统、其构建方法以及在多基因转化中的应用。利用本发明的慢病毒载体表达系统,可以用单一筛选标记实现多个目的基因的转化,可以在多种细胞中提高表达系统的包装率和提高目的基因的表达率。

2021-10-26

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一种核酶介导的多顺反子载体及其构建方法

本发明涉及基因工程领域,特别是涉及一种核酶介导的多顺反子载体及其构建方法。本发明的多顺反子表达载体,包括基本骨架和目的基因表达元件,所述目的基因表达元件中包括核酶序列。当目的基因转录成mRNA后,所述核酶序列通过自发折叠形成活性结构并切割其自身,将含有多个阅读框的长链mRNA拆解成若干个单阅读框的短mRNA。本发明为多基因的表达提供一种全新的思路和技术方案。

2021-10-26

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一种酵母菌重组表达载体及其构建方法与应用

本发明涉及一种酵母菌重组表达载体及其构建方法与应用,该酵母菌重组表达载体含有表达框,所述表达框依次包括位于同一顺反子的待表达目的蛋白的基因、蛋白酶酶切位点的编码序列与抗生素抗性基因；所述蛋白酶酶切位点能够被酵母菌中的蛋白酶特异性识别并切割。本发明还提供了该酵母菌重组表达载体的构建方法及其在筛选高表达目的蛋白的重组酵母菌方面的应用。通过应用本发明的技术方案,可以快速、高通量地筛选得到高表达目的蛋白的重组酵母菌,与现有技术相比,显著减少了复筛时间,降低了假阳性率,提高了筛选效率。

2021-10-22

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用于提高植酸酶在毕赤酵母中的分泌表达的分子伴侣表达载体、菌株

本发明涉及基因工程领域,具体涉及用于提高植酸酶在毕赤酵母中的分泌表达的分子伴侣表达载体、菌株。所述表达载体包括串联的分子伴侣基因BIP和PDI,或者串联的分子伴侣基因VHB和PDI,或者串联的分子伴侣基因HACI和PDI。将经基因工程改造筛选得到的包含上述表达载体的耐高温植酸酶高酶活表达菌株V28-VTR-001,50L发酵总酶活达到37239U/mL的重组毕赤酵母。

2021-10-22

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一种利用爆炸物分子降解基因合成可视化生物感应器的制备方法及其应用

本发明公开了一种利用爆炸物分子降解基因合成可视化生物感应器制备方法及其应用。所述可视化生物感应器是在大肠杆菌细胞中表达爆炸物分子降解基因,包括：dntA、orf和dntB,这些基因可以降解2,4-二硝基甲苯(2,4-DNT)生成2-羟基-5-甲基苯醌,该物质呈现红色,肉眼可见,并且在420 nm处有最大吸光值。本发明的可视化生物传感器通过降解不同浓度的爆炸物分子,生成不同浓度的降解产物2-羟基-5-甲基苯醌,将爆炸物分子浓度与产生的红色降解产物含量进行偶联,实现了爆炸物分子的可视化检测,该检测操作简单、方便、安全性高。

2021-10-22

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一种用于快速高效诱导表达外源蛋白的大肠杆菌工程菌及其制备方法与应用

本发明涉及生物工程技术领域,尤其涉及一种用于快速高效诱导表达外源蛋白的大肠杆菌工程菌及其制备方法与应用。本发明将大肠杆菌菌株B834的阿拉伯糖操纵子araBAD编码区敲除,构建出E.coli B834(ΔaraBAD)菌株,从而成功将阿拉伯糖诱导原核表达系统成功应用于E.coli B834(ΔaraBAD)菌株,形成一套新的快速高效诱导表达外源蛋白稳定表达的大肠杆菌表达系统。pBAD载体能够应用于本发明菌株E.coli B834(ΔaraBAD),且目的蛋白可得到高水平稳定表达。

2021-10-22

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提高胰高血糖素样肽六连体在毕赤酵母中表达水平的方法

本发明公开了提高胰高血糖素样肽六连体在毕赤酵母中表达水平的方法。本发明基于转录组测序分析毕赤酵母低水平表达菌株和高水平表达菌株的差异基因,筛选出一个转录水平差异显著的新基因GESE。本发明利用毕赤酵母CRISPR/Cas9基因敲除技术敲除毕赤酵母宿主中GESE基因后发现6×mGLP-1在毕赤酵母菌株中的表达水平得到显著提高。由此,本发明提供了一种提高胰高血糖素样肽六连体在毕赤酵母中表达水平的方法,包括将宿主毕赤酵母菌株中的GESE基因敲除或进行突变。本发明还进一步提供了胰高血糖素样肽六连体酵母表达载体以及GESE基因编辑载体。本发明为提高外源蛋白基因在毕赤酵母中的表达水平提供基础研究和新途径。

2021-10-01

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