猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白、含该Nsp9蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用

本发明属于生物技术领域,具体涉及猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白、含该Nsp9蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用。本发明将猪流行性腹泻病毒的Nsp9蛋白进行了原核表达,其蛋白产量相当高,另外,本发明首次证明重组Nsp9的原核表达可在小鼠体内诱导活跃的体液和细胞免疫,Nsp9蛋白免疫鼠产生的Nsp9抗体滴度达1:64000,MBP-Nsp9蛋白免疫鼠产生的Nsp9抗体滴度高达1:128000。同时证明了MBP可增强Nsp9的免疫诱导能力,上述结果表明,PEDV的Nsp9蛋白可用于制备PEDV诊断试剂和疫苗。

2021-11-02

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猪流行性腹泻病毒Nsp10蛋白、含该Nsp10蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用

本发明属于生物技术领域,具体涉及猪流行性腹泻病毒nsp10蛋白、含该nsp10蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用。本发明将猪流行性腹泻病毒的nsp10蛋白进行了原核表达,其蛋白产量相当高,另外,本发明首次证明重组nsp10的原核表达可在小鼠体内诱导活跃的体液和细胞免疫,nsp10蛋白免疫鼠产生的nsp10抗体滴度达1:13000,MBP-nsp10蛋白免疫鼠产生的nsp10抗体滴度高达1:42000。同时证明了MBP可增强nsp10的免疫诱导能力,上述结果表明,PEDV的nsp10蛋白可用于制备PEDV诊断试剂和疫苗。

2021-11-02

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一种抗AFP的纳米抗体1B9及其应用

本发明公开了一种抗AFP的纳米抗体,所述纳米抗体具有独特的3个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3,该抗体亲和力可达到1.049E-11,而且能够在AFP血清检测特别是双抗体夹心法中获得优异的检测效果。本发明还提供了一组用于双抗体夹心法检测AFP的纳米抗体组合以及该抗体组合在制备AFP抗原检测试剂盒中的应用,所述组合包括作为捕获抗体的抗AFP二价纳米抗体和作为检测抗体的抗AFP单价纳米抗体。

2021-11-02

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抗PR蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用

本发明涉及一种可以识别人PR抗原的单克隆抗体,其制备方法以及其在免疫检测中的用途。本发明提供一种抗PR蛋白兔单克隆抗体,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。该抗体具有高特异性、敏感性,可以特异性识别表达PR蛋白的细胞,适用于免疫学检测,特别是免疫组化检测。

2021-11-02

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基于天然鸡源噬菌体库对抗孕酮scFv及其制备方法与应用

本发明一种基于天然鸡源噬菌体库对抗孕酮scFv及其制备方法与应用,旨在提供一种利用鸡源scFv天然噬菌体展示抗体库筛选孕酮获取单链抗体的方法；该方法是通过完全抗原(HT-OVA/HT-BSA)交叉包被,孕酮小分子竞争洗脱策略获取明确序列的单链抗体；将已知序列的单链抗体通过热激法转化到原核细胞进行稳定表达；该抗体稳定性好,表达量高,纯度高,这为抗体的获取和生产提供一种快速、可靠的制备方法；本发明以HT-BSA为包被抗原,孕酮小分子作为标准品,利用抗孕酮单链抗体建立竞争型酶联免疫分析方法。

2021-11-02

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抗CK20蛋白的单克隆抗体及其细胞株、制备方法和应用

本发明涉及一种可以识别人CK20抗原的单克隆抗体,分泌细胞株、其制备方法以及其在免疫检测中的用途。上述技术方案选取CK20蛋白C末端的1-424位氨基酸为抗原肽,进行密码子优化,成为适合在大肠杆菌BL21(DE3)表达的基因片段,最后得到的重组蛋白包含GST蛋白标签、CK20蛋白片段及组氨酸蛋白标签。所述重组蛋白对小鼠进行免疫,经细胞融合、筛选和亚克隆,获得高效分泌抗CK20蛋白单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株10A2,以及由该细胞株所分泌的抗CK20蛋白单克隆抗体。本方案得到的抗体具有高特异性、敏感性,可以特异性识别表达CK20蛋白的细胞,适用于免疫学检测,特别是免疫组化检测。

2021-11-02

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一种抗猪流行性腹泻病毒的单链抗体及制备方法

本发明公开了一种小鼠来源的抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的单链抗体及其制备方法。使用小鼠来源的抗PEDV单克隆杂交瘤细胞,扩增IgG抗体的重链可变区和重链可变区序列,经linker相连,克隆进原核表达载体pET-32a,单链抗体的氨基酸序列如所示SEQ ID No.2所示。经IPTG诱导表达、亲和层析纯化得到的单链抗体分子量约为29kDa,ELISA显示单链抗体可特异性识别PEDV,假病毒中和试验显示单链抗体可在细胞水平上中和PEDV假病毒感染PK15细胞的能力。抗PEDV单链抗体有望中和PEDV在仔猪体内的感染活性,阻断病毒在仔猪群中的传染。

2021-11-02

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一种牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白及其制备方法和应用

本发明公开了一种牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白及其制备方法和应用。所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,核酸序列如SEQIDNO.2所示。本申请经PCR扩增PoPGRP原核表达片段,再将其构建到质粒BluntE1上,后导入表达感受态BL21pLysS中进行诱导表达与纯化复性蛋白,从而得到具有活性的牙鲆PGRP重组蛋白。构建得到的牙鲆肽聚糖识别蛋白的重组蛋白可以与革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌发生凝集,同时也具有一定的杀菌作用。

2021-11-02

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CtRALF蛋白质、CtRALF基因、引物、原核表达载体及其应用

本发明公开了CtRALF蛋白质的氨基酸序列、CtRALF基因的核苷酸序列、扩增CtRALF基因的引物、原核表达载体及其应用。本发明的CtRALF蛋白质能调控炭疽菌的定植能力；调控寄主植物的共生信号；调控寄主植物在低磷条件下的生长。本发明对研究炭疽菌定植机制及其与寄主植物共生具有重大价值；其CtRALF蛋白质能够被植物受体蛋白FERONIA响应,从而抑制植物的免疫反应；编码CtRALF蛋白质的CtRALF基因作为与植物共生的靶标基因,调控着植物的生长并缓解磷饥饿。

2021-11-02

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猪血管紧张素转化酶2(ACE2)多克隆抗体的制备

本发明提供了猪ACE2多克隆抗体的制备,构建了ACE2原核表达载体,利用大肠杆菌原核表达系统表达ACE2蛋白,并对蛋白进行纯化。纯化后的蛋白能够制备效价较高的多克隆抗体,并且本发明中的抗原和多克隆抗体可以为进一步开发检测试剂盒奠定基础。ACE2作为RAS系统新的调节因子,通过靶向降解Ang II,发挥舒张血管、抑制炎症及抗纤维化等机体保护功能；作为急性严重呼吸系统综合征冠状病毒(SARS-CoV)主要功能性受体,具有保护肺损伤的功能；ACE2协同氨基酸转运载体转运,与氨基酸吸收不良、肠道微生态平衡和胃肠道炎症发挥重要作用。所以本发明无论是从基础研究还是临床运用上的意义都是十分重大的。

2021-10-29

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