一种小鼠胚胎成纤维细胞直接重编程为黑素细胞的方法

本发明提供一种小鼠胚胎成纤维细胞直接重编程为黑素细胞的方法,包括如下步骤：制备高质量的浓缩慢病毒用于转染备选转录因子；将小鼠胚胎成纤维细胞直接重编程为黑素细胞；优化筛选可用于黑素细胞直接重编程的转录因子；鉴定诱导黑素细胞的功能。本发明是一种优化的高效的黑素细胞直接重编程方法,简化并优化的黑素细胞直接重编程体系,主要包括两方面：制作高质量浓缩病毒和优化重编程培养基成分,提高直接重编程所得到的黑素细胞的功能；筛选作用最显著的转录因子用于黑素细胞直接重编程；对直接重编程的黑素细胞进行功能鉴定,为色素脱失性疾病比如白癜风的病人提供新的治疗策略。

2021-11-02

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一种针对悬浮细胞的慢病毒载体及其应用

本发明公开了一种针对悬浮细胞的慢病毒载体及其应用,属于生物技术领域。本发明中的慢病毒载体是以pLVX-EGFP-IRES-Puro为框架,插入了Ubi启动子和Cbh启动子。该慢病毒载体普遍适用于悬浮细胞的表达,表达效率高效、稳定,能够极大程度地提升悬浮细胞中的过表达效果,且表达过程简单易行,易于推广。

2021-11-02

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一种人肝纤维化诱导模型的工具细胞株构建方法

本发明公开了一种人肝纤维化诱导模型的工具细胞株构建方法,属于生物技术领域。本发明提供一种重组慢病毒载体,包括插入有绿色荧光基因EGFP及人TGF-β1基因的慢病毒载体,所述慢病毒载体选用Tet-On诱导表达慢病毒系统,基于该重组慢病毒载体可构建一种人肝纤维化诱导模型的工具细胞株。该重组慢病毒载体能通过诱导剂Dox持续诱导TGF-β1的过表达,弥补了传统肝纤维化诱导方法过程中需要持续添加重组的TGF-β1因子操作繁琐、费时、成本高、批次差异大等缺陷；且对细胞的毒性小,且制备方法简单,易于工业化生产。

2021-11-02

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用于逆转录病毒载体的生产细胞和包装细胞及其制备方法

本发明涉及一种构建用于生产携带目的核酸片段的逆转录病毒载体生产细胞的方法及通过所述方法获得的生产细胞。

2021-11-02

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融合成像基因及其慢病毒表达质粒、慢病毒、细胞,其制备方法和用途

本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种融合成像基因及其慢病毒表达质粒、慢病毒和细胞,其制备方法和用途。融合成像基因包括生物发光成像基因、荧光蛋白基因和钙成像基因,三种基因之间通过连接基团连接。将融合基因插入改造后的慢病毒表达质粒,获得携带融合成像基因的慢病毒颗粒。慢病毒颗粒可用于不同类型细胞的感染,获得融合成像基因标记的细胞。经本发明中的融合成像基因标记的细胞,可以同步进行细胞的数量成像检测、形态成像检测以及钙活动功能成像检测,在细胞命运追踪方面具有重要用途。

2021-11-02

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抑制长链非编码RNA MALAT1表达的shRNA慢病毒及其应用

本发明提供了抑制长链非编码RNA MALAT1表达的shRNA,其针对Genbank中MALAT1转录本序列NR-002847.3的286、743、1048、4807位点或其他转录本序列中的对应位点设计；本申请还提供了相应质粒、慢病毒、药物组合物及其在治疗认知障碍中的应用。本发明的MALAT1-shRNA干扰质粒能显著特异性抑制海马神经元内MALAT1的表达,促进神经元细胞周期的进程,抑制神经元凋亡和凋亡关键蛋白的表达,从而起到抵抗应激诱导的神经元细胞损伤的作用。

2021-11-02

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CAR-T细胞及其制法

本发明涉及CAR-T细胞及其制法。具体地说,一方面,涉及一种编码的嵌合抗原受体,包括作为第一信号的抗原结合结构域、跨膜结构域、作为第二信号的细胞内传导结构域、以及表达IL-7和CCL-17细胞因子的第三信号域。本发明还涉及一种重组质粒、一种能够分泌表达IL-7、CCL17因子和/或PD-1、GM-CSF抗体的CAR-T细胞。本发明呈现如说明书所述优异效果。

2021-11-02

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一种具有己糖激酶2抑制活性的基因、蛋白、载体、慢病毒及应用

本发明涉及生物医药及分子生物学领域,具体涉及一种具有己糖激酶2抑制活性的基因、蛋白、载体、慢病毒及应用。所述基因为MTSS1基因,其编码编码的MTSS1蛋白通过竞争性的结合线粒体结合型HK2来抑制HK2的活性,下调乳腺癌细胞有氧糖酵解水平,进而抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移,为临床上靶向HK2抑制乳腺癌转移提供了新的治疗方向和应用依据。

2021-10-29

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CD19靶向性的嵌合抗原受体及其应用

本发明提供CD19靶向性的嵌合抗原受体,含有依次连接的CD19scFv、CD8的铰链区、CD8的跨膜区、4-1BB共刺激因子和CD3ζ的胞内信号结构域。本发明还提供相应的CAR-T细胞在制备治疗或辅助治疗肿瘤的产品或在制备杀伤肿瘤细胞的产品中的应用。本申请人在针对CD19的二代CAR的基础上,通过缺失突变,去除掉CD8铰链区的两个甘氨酸,以降低其柔韧性,将这样的CAR-T细胞命名为2nd-GG,将经典的CAR-T细胞命名为2nd。实验发现降低CAR铰链区柔韧性的2nd-GG细胞相比2nd细胞能更加有效的控制肿瘤负荷,且分泌更少的促炎因子,这有可能会降低CAR-T细胞在实际使用过程中的不良反应。

2021-10-29

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一种用于多基因转化的慢病毒载体表达系统

本发明提供一种利用分裂单一筛选标记实现对多基因转化的慢病毒载体表达系统,包括慢病毒载体表达系统、其构建方法以及在多基因转化中的应用。利用本发明的慢病毒载体表达系统,可以用单一筛选标记实现多个目的基因的转化,可以在多种细胞中提高表达系统的包装率和提高目的基因的表达率。

2021-10-26

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