本发明公开了3种重组腺病毒以及SARS-CoV-2 Spike蛋白的RBD以及它们的应用。本发明提供了重组腺病毒：表达序列表的序列3所示蛋白质的重组腺病毒；表达序列表的序列5所示蛋白质的重组腺病毒；表达序列表的序列1所示蛋白质的重组腺病毒。序列表的序列1所示的蛋白质即全长SARS-CoV-2 Spike蛋白。序列表的序列3所示的蛋白质即具有膜锚定信号肽的SARS-CoV-2受体结合域RBD蛋白。序列表的序列5所示的蛋白质即具有分泌型信号肽的SARS-CoV-2受体结合域RBD蛋白。本发明研发的针对新型冠状病毒SARS-CoV-2的疫苗具有重要的理论指导价值和广泛的应用前景,为新型冠状病毒肺炎的根治提供了可能性。

本发明提供了一种腺相关病毒(AAV)载体基因疗法,其用于治疗单基因形式的肾病综合征,其中AAV载体包含NS相关转基因和最小nephrin启动子NPHS1或podocin启动子NPHS2。

本发明提出了含有重组蛋白和保护蛋白的复合物在治疗肺鳞癌中的应用,所述重组蛋白包括：上皮细胞黏附分子抗体片段；腺病毒受体免疫球蛋白样细胞黏附分子的胞外区片段；以及T4噬菌体Fibritin片段,所述T4噬菌体Fibritin片段的两端分别连接所述上皮细胞黏附分子抗体片段和腺病毒受体免疫球蛋白样细胞黏附分子的胞外区片段；所述保护蛋白包括：腺病毒表面蛋白Hexon抗体片段；以及T4噬菌体Fibritin片段,所述T4噬菌体Fibritin片段与所述腺病毒表面蛋白Hexon抗体片段相连。本发明的复合物既可以特异性识别肺鳞癌细胞,提高感染肺鳞癌细胞效率,也可以降低机体对腺病毒的免疫反应,从而实现腺病毒基因编辑治疗,为肺鳞癌治疗提供了科学研究和临床应用基础,应用前景好。

本发明提供一种杀伤基因突变肿瘤细胞药物及其制备方法和应用,涉及生物医药技术领域,其中所述杀伤基因突变肿瘤细胞药物至少包括重组腺病毒Adv-Cas9～(D10A)-EGFP、Adv-Donor-gRNA和GCV,所述Adv-Donor-gRNA中的Donor序列包含HSV-TK和Reporter gene,其中所述Adv-Cas9～(D10A)-EGFP用于在肿瘤细胞中基因突变位点附近的DNA链产生两个缺口,所述Adv-Donor-gRNA用于将HSV-TK-Reporter gene序列插入到剪开的缺口中,所述GCV用于靶向性杀伤基因突变肿瘤细胞。本申请提供的杀伤基因突变肿瘤细胞药物,利用CRISPR/Cas9～(D10A)基因编辑系统的高靶向性和HSV-TK/GCV自杀基因系统的高杀伤性,准确地将HSV-TK基因插入发生S45P突变的beta-Catenin肿瘤细胞中,使用前体药物GCV进行杀伤,可以有效地诱导携带基因突变细胞的死亡,从而达到靶向性杀灭肿瘤细胞的目的。

根据本发明的方面,提供了用于在脑中产生新神经元的体内方法,其包括将NeuroD1导入神经胶质细胞,特别是导入反应性星形胶质细胞或NG2细胞,由此将所述反应性神经胶质细胞“转化”为神经元。根据本发明的方面,提供了在神经胶质细胞中产生神经元表型的方法,其包括在所述神经胶质细胞中表达外源的NeuroD1,其中表达外源的NeuroD1包括将包含编码外源NeuroD1的核酸的表达载体(如病毒表达载体)递送到所述神经胶质细胞中。

本申请涉及用于联合免疫治疗的方法和组合物。本发明提供了用于使用腺病毒载体产生免疫应答的方法,该方法允许使用相同腺病毒载体进行多次疫苗接种以及在具有预先存在的对腺病毒的免疫力的个体中进行疫苗接种。

本发明提供一种包含改造的SARS-CoV-2的刺突蛋白的疫苗组合物,该疫苗组合物将复制缺陷型人5型腺病毒rAd病毒株与新型改造的SARS-CoV-2的刺突蛋白(S6P)或其免疫原性衍生物结合构建重组复制缺陷型人5型腺病毒,用于预防新型冠状病毒的感染,尤其是针对哺乳动物的新型冠状病毒的感染。

本发明提供一种表达山羊SLAM(goat SLAM,gSLAM)的重组腺病毒(rAD-gSLAM),利用其感染羊源原代细胞并可表达gSLAM受体,提高该细胞对PPRV的易感性,为PPRV的分离培养及与宿主细胞相互作用等研究提供重要的研究工具。

本发明公开了一种基于棘突蛋白基因修饰干细胞的新型冠状病毒疫苗、其制备方法及应用。所述疫苗的活性成分为三聚体形式的棘突蛋白基因修饰的间充质干细胞,用于表达棘突蛋白的核苷酸序列具有SEQ ID NO：2所示序列。所述制备方法包括：构建表达棘突蛋白的腺病毒载体、制备棘突蛋白重组腺病毒颗粒、纯化富集腺病毒颗粒、获取间充质干细胞、获取棘突蛋白编码基因修饰的人脐带间充质干细胞。本发明的疫苗通过棘突蛋白的基因重组型间充质干细胞表达棘突蛋白来启动人体针对新型冠状病毒的免疫反应,产生病毒中和性抗体,从而避免病毒对人体的感染,安全、可靠、有效,具有良好的应用前景,为新型冠状病毒的预防提供了全新的选择。