本发明提供了一种VWB-attP和φC31-attP整合酶介导的基因重组方法及在链霉菌中应用。具体地,本发明利用VWB-attP整合酶和φC31-attP整合酶系统介导的位点特异性整合机制将这两种整合酶模块构建在同一个含有目的基因的质粒中,通过属间接合转移可快速将需要表达的目的基因以多拷贝的数量重组至链霉菌染色体的相应attB位点上。本发明的方法在阿维菌素,红霉素和林可霉素产生菌中进行了应用。

本发明涉及一种高产ε-聚赖氨酸的基因工程菌株淀粉酶产色链霉菌ΔcadA(Streptomyces diastatochromogenesΔcadA)并提高ε-聚赖氨酸发酵水平的方法,所述高产基因工程菌株的构建步骤如下：步骤1,构建敲除赖氨酸脱羧酶基因cadA质粒pJTU 412-ΔcadA；步骤2,缺失cadA基因菌株的获得,即高产ε-聚赖氨酸的基因工程菌株淀粉酶产色链霉菌ΔcadA。经过实验证实,该链霉菌基因工程菌株在相同情况下较原始菌株淀粉酶产色链霉菌TUST生产ε-聚赖氨酸的能力显著提高了35.6％,为ε-聚赖氨酸生产提供了优良菌种。

本申请提供了用于精细化学品的改进生产的重组微生物,以及重组核酸分子、重组微生物和生产丙氨酸的方法。还提供了所述重组核酸分子或重组微生物发酵生产丙氨酸的用途。

本发明提供了一种植物细胞分裂素狭霉素的生物合成基因簇及其生物材料以及在合成狭霉素中的应用,所述基因簇的核苷酸序列为SEQ ID NO:1中所示第255～8993位序列,以及SEQ ID NO:2中所示第91～8961位序列,共包含9个基因,其中agmA,agmB,agmC,agmD,agmE和agmF是狭霉素生物合成过程中的必须基因,agmT1和agmT2是编码转运蛋白的基因,agmR为调控基因。本发明提供了狭霉素生物合成基因簇及相关蛋白信息,揭示了核苷类抗生素狭霉素的生物合成机制,为进一步遗传改造提供了材料和方法。本发明所提供的基因及其编码的蛋白也可以用来体外合成狭霉素。

本发明属于抗生素制药领域,涉及地贝卡星生物合成制备方法。具体地说,本发明利用庆大霉素生物合成中的双脱氧基因,通过组合生物学在产生卡那霉素B的菌种中进行内源性表达,获得地贝卡星生产菌株。本发明从棘孢小单孢链霉菌中克隆得到负责庆大霉素双脱氧过程的三个基因genP、genB3、genB4,其基因序列如SEQ ID NO.1-3所示。通过组合生物学技术在产生卡那霉素B的链霉菌中表达双脱氧基因genP、genB3、genB4,双脱氧酶系在体内催化卡那霉素B的3’,4’羟基双脱氧生成地贝卡星。本发明利用双脱氧酶系通过组合生物学生物合成地贝卡星,极大降低化学合成的工业成本,环境友好,具有重要的工业应用价值。

本发明公开了一种启动子及重组载体和用途。具有启动子功能的基因,其特征在于,所述序列如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8所示。所述启动子具有启动子功能,同时该启动子所示DNA序列构建的重组载体导入链霉菌,添加纤维二糖后可提高链霉菌产生天然蓝色素。